假基因PTENP1通过调控PTEN蛋白的表达影响胃癌进展的研究
作者: |
1夏加增,
1过小强,
1邓凯元,
1王浩
1 南京医科大学附属无锡二院,无锡 214002 |
通讯: | |
DOI: | 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.06.S111 |
摘要
目的:长链非编码RNA(long non-codingRNAs,lncRNAs)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子,它们缺乏蛋白编码的潜能。近年来,大量证据表明lncRNAs能以RNA的形式在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)调控基因的表达,从而在细胞增殖、细胞周期、分化和凋亡等多种生物学进程中发挥重要的作用。假基因转录得到的RNA也属于lncRNA的一类,以前被认为没有生物学功能,然而最近一些假基因被证实在肿瘤的发生中发挥着关键的作用。PTENP1被发现在几种肿瘤细胞中发挥着抑癌作用,然而它在胃癌中的表达和生物学功能仍不清楚。本文主要研究胃癌组织和细胞系中PTENP1的表达水平及其与临床病理资料的关系,并探索PTENP1在胃癌细胞中发挥的生物学功能及相关机制。方法:通过实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测68例胃癌组织及4个胃癌细胞系中PTENP1的表达水平;通过去甲基化药物处理,研究PTENP1启动子异常甲基化与其表达的关系;分别转染pLJM-3'UTR或pLJM空质粒进入胃癌细胞系MGC-803及SGC-7901,通过CCK-8及平板克隆实验研究PTENP1对胃癌细胞增殖能力的影响,通过流式细胞分析及Hoechst staining实验研究PTENP1对细胞凋亡的影响,通过细胞划痕实验和transwel l研究PTENP1对细胞迁移和侵袭能力的影响;通过qRTPCR及Western blot分析质粒转染后PTEN的表达变化。结果:qRT-PCR检测结果显示PTENP1表达在胃癌组织和细胞系中显著下调,其表达下调可能部分与DNA超甲基化有关。而且,PTENP1的低表达与肿瘤的大小、胃癌病人临床分期、胃癌浸润深度及淋巴结转移有关。另外,结果显示PTENP1 能够调节胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。并且,PTENP13'UTR的表达升高能够提高PTEN蛋白的表达水平。结论:PTENP1在胃癌中表达显著下调,并能通过调节PTEN蛋白的表达发挥抑癌作用。
关键词:
PTENP1
胃癌
生物学功能
PTEN蛋白
实时定量
DOI: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.06.S111