全面分子筛选:从RT-PCR 到RNA 测序
作者: |
1Carlota Costa,
1Ana Giménez-Capitán,
1Niki Karachaliou,
1,2Rafael Rosell
1 Breakthrough Cancer Research Unit, Pangaea Biotech S.L, USP Dexeus University Institute, Barcelona, Spain 2 Catalan Institute of Oncology, Hospital Germans Trias i Pujol, Ctra. de Can Ruti s/n. 08916 Badalona, Spain |
通讯: |
Carlota Costa
Email: ccosta@pangaeabiotech.com |
DOI: | 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.04.035 |
摘要
到目前为止,对肿瘤和非肿瘤中mRNA表达的分析主要是通过RT-PCR方法。认为它是测定特定靶 基因的拷贝数的金标准。RT-PCR的应用提示RNA转录水平可以辅助对各种疾病患者进行分类和预 测其预后,这为一些重要的临床试验提供了依据。然而,定量PCR数据质量的固有变异性使其很 难重复,并且分析某个基因需要在实验室耗费大量时间。此外,比较基因在不同的实验中的表达 水平往往很困难,并且需要复杂的标准化方法。多年来,许多已开发的技术均未能很好地应用于 临床。RNA测序是一个新的、简单而有效的用来测定转录组的构成及发现新的外显子或基因的方 法。该技术的优点是可重复性高,测序范围广,对RNA样本量的要求低,即使没有基因组测序也 能够检测新的转录和剪接。然而,这种RNA测序技术不可能取代目前的RT-PCR方法,但能够根据 需求及医院和实验室的资源与其互补。先以RNA测序确定出部分基因,再利用RT-PCR方法进行进 一步的检测。这两个互补的技术能够识别肿瘤所有的分子特征,若作为常规分析应用于癌症实验 室,将有助于对病人的分类,同时可以协助肿瘤学家做出临床决策。
关键词:
分子筛选
RT-PCR
RNA测序
mRNA表达
Comprehensive molecular screening: from the RT-PCR to the RNA-seq
CorrespondingAuthor: Costa Carlota Email: ccosta@pangaeabiotech.com
DOI: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.04.035