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@article{LCBL35436,
	author = {秀敏 刘 和 云 潘 和 春萌 宁 和 波 高},
	title = {慢病毒介导的shRNA靶向干扰NSD2三阴乳腺癌稳定细胞株的建立},
	journal = {临床与病理杂志},
	volume = {39},
	number = {11},
	year = {2019},
	keywords = {},
	abstract = {目的：构建针对核受体结合SET结构域蛋白2(nuclear receptor binding SET domain protein 2，NSD2)的短发夹干扰RNA(short hairpin RNA，shRNA)慢病毒干扰载体，建立稳定干扰NSD2基因的MDA-MB-231三阴乳腺癌细胞株。方法：构建2条针对人源NSD2基因的shRNA(shNSD2-1#和shNSD2-2#)，连接到慢病毒载体(pGLV10/U6/RFP/Puro)并进行测序鉴定。将NSD2 shRNA慢病毒载体与包装质粒共转染到293T细胞，慢病毒包装后进行滴度检测。将包装好的慢病毒转染至三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞中，嘌呤霉素筛选建立稳定转染NSD2 shRNA的细胞株。采用real-time PCR检测NSD2 mRNA的表达变化，蛋白质印迹法检测NSD2及其特异性催化的组蛋白甲基化标志物H3K36me2蛋白水平的表达变化。结果：成功构建两个NSD2 shRNA慢病毒干扰载体；与阴性对照组相比，shNSD2-1#组和shNSD2-2#组MDA-MB-231细胞中NSD2 mRNA和蛋白水平均显著下调，NSD2催化的H3K36me2蛋白表达也随之下调。结论：本研究成功建立了shRNA慢病毒载体介导的稳定敲低NSD2的MDA-MB-231细胞株，证实干扰NSD2基因表达能有效抑制其对组蛋白H3K36的甲基化作用，为进一步研究NSD2在乳腺癌中的作用机制奠定了基础。},
	url = {https://lcbl.amegroups.com/article/view/35436}
}